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儀表網 行業標準】由國家糧食和物資儲備局組織起草的《糧油檢驗 谷物中淀粉含量的測定 分光光度法》標準已形成征求意見稿,現向社會公開征求意見,截止日期為2023年7月19日。意見反饋郵箱:tc270sc1@ags.ac.cn。
谷物胚乳中最主要的碳水化合物為淀粉,質量分數在70%~80%。淀粉不僅是人類主要的食物來源,也是應用廣泛的工業原材料。淀粉工業已成為重要的工業,淀粉及其制品的應用越來越廣泛,其產品幾乎應用于各個領域,對工業和人們的日常生活產生著重要影響,且淀粉在諸多領域有著不可替代的作用和應用價值。
總淀粉含量的測定方法分為間接測定法和直接測定法兩種。其中,將測定時不需要對樣品中的淀粉進行水解,轉化為還原糖的方法稱為直接測定法;將測定時需要對樣品中的淀粉進行水解轉化成還原糖,然后測定還原糖的含量,最后用還原糖的量計算淀粉含量的方法定義為間接測定法。間接法一般分為兩個步驟,一是樣品中淀粉的水解,二是還原糖的測定。迄今為止,淀粉的水解方法有酶解法和酸解法兩種。國標法 GB 5009.9-2016《食品安全國家標準 食品中淀粉的測定》中第一法酶解法和第二法酸水解法測定總淀粉含量結果準確,但操作步驟繁瑣,使用試劑種類多,測定時間長,分析速度慢,對操作要求比較嚴格。需要測試人員具備良好的試驗技能,適合對測定結果要求較高且測定的樣品數量較少的試驗使用。與此同時,食品行業日常生產質控、第三方檢測機構為社會提供食品檢驗技術服務,均需要更加操作簡便、經濟高效、結果準確、適用性廣的檢測方法,現有標準方法尚不能完全滿足。
本標準在酶解法的基礎上,為改善酶解法和水解法測定過程中一系列影響檢測技術性能的問題,針對現有的淀粉總量測定方法進行研究,規范檢測方法標準,提高檢測效率和檢測結果準確性,旨在建立科學規范的快速檢測定量方法,進一步準確評價谷物中淀粉含量的準確性,鼓勵糧食的生產和推廣,加強政府監管能力,保障人民群眾的身體健康。
本文件按照GB/T 1.1—2020《標準化工作導則 第1部分:標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。本文件規定了谷物中淀粉含量的檢測方法。本文件適用于谷物中淀粉含量的檢測。
原理:
耐熱α-淀粉酶將淀粉水解為可溶性直鏈和支鏈麥芽糊精,淀粉葡萄糖苷酶將麥芽糊精水解成D-葡萄糖,D-葡萄糖被氧化為D-葡萄糖酸脂,釋放出H2O2,再用過氧化氫酶催化進行顯色反應,產生的醌亞胺染料用比色法測定。
儀器和設備:
1.
分析天平:感量 0.01g、0.001g、0.0001g。
2.旋風磨:樣品粉碎后可通過40目篩網。
3.紫外可見分光光度計:配1cm 比色皿。
4.恒溫水浴鍋:100 ℃±2 ℃、50 ℃±1 ℃。
5.渦旋混合器。
6.pH 計:精度±0.01。
7.離心機:轉速不低于3000 r/min。
8.干燥箱。
9.移液器:量程10uL~100uL、20uL~200uL、1000uL~5000uL、1000uL~10000uL,配備一次性吸頭。
10.離心管:15mL、50mL 聚丙烯離心管。
試樣處理:
準確稱取待測樣品100 mg±5 mg(準確至0.001 g),置于15 mL聚丙烯離心管底部。向待測離心管中加入5.0 mL 80%乙醇溶液,在80 ℃~85 ℃下水浴保持5 min,混勻;再次加入5.0 mL 80%乙醇溶液,3000 r/min離心10 min,棄去上清液;加入10.0 mL 80%乙醇溶液,混勻,3000 r/min離心10 min,棄去上清液。向離心管中加入0.2 mL 80%乙醇溶液,渦旋混合均勻。加入3 mL耐熱α-淀粉酶,沸水浴中保持12 min,每隔4 min振蕩一次。加入100 uL淀粉葡萄糖苷酶,渦旋混合均勻,50 ℃下水浴保持30 min。
將離心管中的樣品全部轉移至100 mL容量瓶,用蒸餾水沖洗離心管2次~3次并轉入容量瓶中,蒸餾水定容至100 mL,混勻,轉入50 mL離心管中,3000 r/min離心10 min,取上清液,備用。
測定:
準確移取7.4試樣離心后的上清液0.1 mL、葡萄糖標準溶液0.1 mL和水0.1 mL(試劑空白)置于三個15 mL聚丙烯離心管中,分別加入3.0 mL葡萄糖氧化酶-過氧化物酶-緩沖液混合物,50 ℃下水浴反應20 min;取出離心管,冷卻至室溫。
用分光光度計于波長510 nm處分別測定樣品溶液(????)、葡萄糖標準工作溶液(??1)和試劑空白溶液(??0)的吸光度值。
精密度:
在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。
其他:
本方法定量限為3.0g/100g。
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