【儀表網(wǎng) 儀表標(biāo)準(zhǔn)】根據(jù)《青島微藻產(chǎn)業(yè)學(xué)會團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)管理辦法》，由青島微藻產(chǎn)業(yè)學(xué)會批準(zhǔn)立項(xiàng)，中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所牽頭起草的《海水中喹諾酮類抗生素的測定 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)已完成征求意見稿，現(xiàn)公開征求意見，誠摯邀請各相關(guān)單位和個(gè)人對上述標(biāo)準(zhǔn)提出寶貴的意見和建議。
 

　　目前，我國對水產(chǎn)品中喹諾酮類抗生素的殘留已經(jīng)展開了充分的調(diào)查研究，針對海洋環(huán)境中喹諾酮類抗生素的檢測也得到了越來越多的重視。已經(jīng)報(bào)道的檢測方法中存在許多問題，比如待測的喹諾酮類抗生素種類不全、回收率不理想、靈敏度低等，而且現(xiàn)在針對此類抗生素在環(huán)境中的檢出尚無完整的一套檢測標(biāo)準(zhǔn)。因此，迫切需要建立海水中喹諾酮類抗生素的高靈敏度、準(zhǔn)確、快速、簡便的檢測標(biāo)準(zhǔn)。
 

　　為了對環(huán)境中抗生素進(jìn)行有效監(jiān)控，由中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所牽頭，聯(lián)合青島浩澳環(huán)保科技有限公司、天祥(天津)質(zhì)量技術(shù)服務(wù)有限公司青島分公司聯(lián)合起草標(biāo)準(zhǔn)，并申請作為青島微藻產(chǎn)業(yè)學(xué)會團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行發(fā)布。本標(biāo)準(zhǔn)于2022年7月6日被青島微藻產(chǎn)業(yè)學(xué)會批準(zhǔn)立項(xiàng)，團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)號為T/QMIS 2022-03，團(tuán)標(biāo)名稱暫定為《海水中喹諾酮類抗生素的測定 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》。
 

　　本標(biāo)準(zhǔn)按照 GB/T 1.1-2020 給出的規(guī)則起草。參考GB/T 6379.2 測量方法與結(jié)果的準(zhǔn)確度(正確度與精密度)第2部分：確定標(biāo)準(zhǔn)測量方法重復(fù)性與再現(xiàn)性的基本方法；GB/T 6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法；GB 17378.2 海洋監(jiān)測規(guī)范第2部分：數(shù)據(jù)處理與分析質(zhì)量控制；GB 17378.3 海洋監(jiān)測規(guī)范第3部分：樣品采集、貯存與運(yùn)輸?shù)纫?guī)程編制。
 

　　本方法規(guī)定了液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)測定海水中17種喹諾酮類藥物殘留量的樣品采集、處理、分析步驟、結(jié)果計(jì)算、質(zhì)量保證和質(zhì)量控制的方法和程序。
 

　　本方法適用于海水、河口水及入海排污口污水樣品中依諾沙星、麻保沙星、氧氟沙星、培氟沙星、氟羅沙星、洛美沙星、諾氟沙星、環(huán)丙沙星、奧比沙星、恩諾沙星、丹諾沙星、沙拉沙星、司帕沙星、雙氟沙星、噁喹酸、氟甲喹、萘啶酸單種或多種藥物殘留量的測定。
 

　　海水中喹諾酮類藥物的檢出限為5.0 ng/L，檢測定量限為20.0 ng/L。
 

　　方法原理：
 

　　海水樣品中的喹諾酮類藥物經(jīng)固相萃取柱富集、凈化，用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測定，內(nèi)標(biāo)法定量分析。
 

　　儀器和設(shè)備：
 

　　1.液相色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜儀(LC-MS/MS)：配電噴霧離子源(ESI)。2.天平：感量 0.01g。3.分析天平：感量0.00001g。4.渦旋混合器。5.氮吹儀。6.pH 計(jì)。7.固相萃取裝置。8.固相萃取柱：500mg/6mL，Oasis HLB 柱或性能相當(dāng)者。9.醋酸纖維濾膜：0.45µm。10.水相和有機(jī)相濾膜：0.22µm。11.尖底玻璃離心管：具刻度，10mL。12.棕色容量瓶：10 mL 、100mL和 500mL。
 

　　提取和凈化：
 

　　固相萃取柱(5.9)置固相萃取裝置(5.7)上，依次用6 mL甲醇和6 mL乙酸銨溶液(4.8)進(jìn)行平衡活化，備用。
 

　　準(zhǔn)確量取500 mL經(jīng)0.45 µm醋酸纖維膜過濾后的海水樣品，加入適量鹽酸溶液(4.7)調(diào)節(jié)pH至3，準(zhǔn)確加入1 µg/mL混合內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液50µL(4.16)，搖勻，以約5 mL/min的流速通過活化后的固相萃取柱。然后用10 mL乙酸銨溶液(4.8)淋洗，用氮?dú)獯抵两桑?mL甲醇(4.2)洗脫，收集洗脫液于10 mL尖底玻璃離心管(5.11)中，尖底玻璃離心管置于氮吹儀(5.5)內(nèi)，40℃水浴下用氮?dú)獯抵两桑瑲埩粑镉?.1%甲酸水-乙腈(4.10)稀釋至1mL，用渦旋混合器(5.4)渦旋混勻1 min，經(jīng)0.22 µm水相和有機(jī)相濾膜(5.10)過濾至進(jìn)樣瓶中，待測。
 

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：
 

　　準(zhǔn)確吸取混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液(4.15)適量，用 0.1%甲酸水-乙腈(4.10)逐級稀釋，配 制成濃度為 1、2、5、10、20、50、100 和 200 ng/mL 的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，同時(shí)加入混合內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液(4.16)，使內(nèi)標(biāo)濃度均為 50 ng/mL。以被測組分與其對應(yīng)內(nèi)標(biāo)的峰面積比值為縱坐標(biāo)，以系列標(biāo)準(zhǔn)溶液中各個(gè)組分含量與對應(yīng)內(nèi)標(biāo)含量比值為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程和相關(guān)系數(shù)。
 

　　精密度和準(zhǔn)確度：
 

　　6家實(shí)驗(yàn)室對10.0 ng/mL、50.0 ng/mL和100.0 ng/mL三個(gè)加標(biāo)水平的海水樣品分別進(jìn)行了5次重復(fù)測定：在10.0ng/m添加水平下，六家實(shí)驗(yàn)室相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.67%～5.41%；實(shí)驗(yàn)室間再現(xiàn)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.28%；在20.0ng/m添加水平下，六家實(shí)驗(yàn)室相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.67%～5.41%；實(shí)驗(yàn)室間再現(xiàn)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.28%；在50.0ng/m添加水平下，六家實(shí)驗(yàn)室相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.67%～5.41%；實(shí)驗(yàn)室間再現(xiàn)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.28%。