豬轉化生長因子β1elisa試劑盒操作說明

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實驗前準備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞 培養上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。 仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（2）血漿：

應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分 鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如 有沉淀形成，應再次離心。

（3）尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保 存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

（4）細胞培養上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分 ）。仔細收集上清。

（5）培養細胞

檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀 釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃 取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/ 分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（6）組織標本

切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS， PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入 一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿 化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢 測，其余冷凍備用。