【儀器心得】ABI 7500超微量實時熒光定量PCR儀使用心得
ABI 7500超微量實時熒光定量PCR儀是一臺特異性靶基因檢測與定量分析一體化的儀器,檢測過程中可以動態觀察儀器每一循環過程每一個反應管中PCR擴增產物不斷增加的視覺感受,檢測結果出的也是非常的快,檢測結束后馬上就能出來。
五色熒光檢測,光源是鹵鎢燈。鹵鎢燈光源通過五色光源濾光片后會激發每一個檢測樣品,得到CCD成像。儀器的靈敏度和定量分析準確性非常的高,紅色熒光檢測時尤為突出。定量檢測速度也是很快,一般不超過2小時,快速模式更快,一般不超過40分鐘。可采用96孔反應板或單管以及8聯管檢測都可以。反應體積也是很小,可達到微量級的10~100微升。
可用于相對定量的基因分析,以建立的標準曲線為基礎的病原體定量分析,PCR擴增后核酸序列的SNP基因定性分析,以陽性內標對照品數據為基礎的陽性、陰性結果判定等應運。
分析軟件具有擴增反應曲線實時監測;自動設定熒光基線,自動計算熒光閾值;建立標準曲線進行靶基因定量分析;在儀器運行的同時可以觀察解離曲線數據;具有對光源使用時間數據的監測;具有系統自我診斷功能,可以對系統故障實時診斷,自動對樣品陽性或陰性進行判斷等諸多優良的使用功能。儀器體積小,非常適宜在實驗室使用。
儀器溫度控制是檢測的一大重要指標,該PCR儀溫度范圍是4℃~100℃,快速升降溫速率可以達到±3.5℃/s,準確度可達±0.25℃,控溫范圍寬,升降溫快,溫度控制精準。
使用很簡單,在電腦上編好方法,點擊開始檢測,儀器就自動進行檢測,不用人為干預,實驗員算好檢測時間,到點看結果就可以,結果也可以生成PDF檢測報告,也可以打印。
總體,該儀器具使用范圍廣,檢測靈敏度高,準確性好,檢測高效、快速,軟件功能也很強大等優點,用著很滿意,使用感覺很好。