国产精品无人区无码AV片软件,无码中文av波多野吉衣,污污内射在线观看一区二区少妇,色色av资源网

產品推薦:水表|流量計|壓力變送器|熱電偶|液位計|冷熱沖擊試驗箱|水質分析|光譜儀|試驗機|試驗箱


儀表網>技術中心>技術原理>正文

歡迎聯系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

CELLSCRIPT™體外加帽試劑盒工作原理

來源:北京百奧創新科技有限公司   2022年03月04日 13:37  

CELLSCRIPT™的使命是提供簡單安全高效的轉錄產品和技術,用于制造和使用RNA以便進行臨床研究和治療的細胞翻譯。

 

目前的產品包括多種體外轉錄試劑盒、加帽類似物或加帽酶的5' RNA加帽試劑盒和3' RNA多聚腺苷酸化的試劑盒,以及用于轉錄、加帽、poly(A)mRNA以進行翻譯的多合一試劑盒。

 

其中,ScriptCap™ Cap 1 Capping SystemC-SCCS1710包含ScriptCap加帽酶、ScriptCap 2'-O-甲基轉移酶、GTPSAM等成分,對體外轉錄的RNA進行轉錄后加帽修飾。Cap 0Cap 1上限均可構建,效率接近100%(這不能通過共轉錄加帽方法來完成)。

 

ScriptCap加帽酶在體外催化具有5‘-三磷酸基的初級RNA5’末端加成帽核苷酸。帽核苷酸是一種Guanine核苷,它通過5‘C連接到一個三磷酸基團,然后再連接到初級mRNA轉錄本中最多的5’核苷酸的5‘碳上,在大多數真核生物中,帽核苷酸中Guanine7位的氮是甲基化的。表示為:m7G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3')。其中m7G代表N7-甲基Guanine核苷,PPP代表帽子核苷的5’碳與初級RNA轉錄本的第一個核苷酸之間的三磷酸橋,N1(PN)x-OH(3’)代表初級RNA轉錄本,其中N1是最多的5’核苷酸。

 

ScriptCap加帽酶可依次催化三種不同的酶反應:

 

(1) RNA三磷酸酶將RNA5‘三磷酸裂解成二磷酸:

 

pppN1(p)Nx-OH(3')——ppN1(pN)x-OH(3') + Pi

 

(2) RNA鳥苷酸轉移酶將GTP連接到RNA5‘核苷酸(N1)5’二磷酸上:

 

ppN1(pN)x-OH(3') + GTP——G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3') + PPi

 

(3) Guanine-7-甲基轉移酶以S-腺苷Methionine(SAM或ADOMet)為輔因子,催化帽核苷酸中Guanine7-氮的甲基化:

 

G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3') + AdoMet——m7G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3') + AdoHyc

 

 

這一過程被稱為蓋帽,與未蓋帽的RNA相比,它提高了RNA的穩定性和翻譯效率。ScriptCap蓋帽酶構建的封端RNA產物具有“0”帽結構。在體外,通過同時使用ScriptCap 2‘-O-甲基轉移酶和ScriptCap蓋帽酶,可以將CAP0 RNA轉化為“CAP1”結構。

 

ScriptCap 2‘-O-甲基轉移酶通過將供體分子SAM上的甲基轉移到CAP 0 RNA倒數第二個核苷酸的2’-O位,從CAP 0-RNA制備CAP1-RNA,合成具有CAP 1結構的RNA。

 

Omicron3.png


 

Cap1 RNA可以進一步提高mRNA的體內翻譯效率,并有助于將mRNA標記為相對于細胞內免疫監視機制的自身RNA”

 

 

ScriptCap1蓋帽系統提供了一種在IVT反應中通過共轉錄蓋帽來制造蓋帽RNA的替代方案,在IVT反應中,用二核苷酸蓋帽類似物(例如m7GpppG)代替部分GTP,如果RNA5‘末端不是結構化的,使用ScriptCap 1蓋帽系統的蓋帽效率可以接近100%。相反,由于CAP類似物與GTP競爭RNA聚合酶的轉錄啟動,共轉錄的蓋帽效率受到CAP類似物的濃度及其與GTP濃度之比的限制。因此,在轉錄反應中使用CAP類似物蓋帽的RNA百分比總是小于100%。在使用CAP類似物的共轉錄蓋帽反應中可以產生的CAP RNA的量也受到降低GTP濃度以允許CAP類似物競爭轉錄起始的需要的限制。另一方面,如果要蓋帽的RNA具有高度結構的5‘末端,則與CAP類似物共轉錄蓋帽可能是有益的。

 

優勢:靈活進行cap0cap1的加帽;效率*,接近100%;同類產品可直接交叉使用以及價格合適。

 

應用:進行體外mRNA的修飾,用作體外蛋白表達系統和生理試驗;前體mRNA的研究試驗以及疫苗研究。

 


免責聲明

  • 凡本網注明“來源:儀表網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-儀表網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:儀表網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
  • 本網轉載并注明自其它來源(非儀表網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點或和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。
聯系我們

客服熱線: 15267989561

加盟熱線: 15267989561

媒體合作: 0571-87759945

投訴熱線: 0571-87759942

關注我們
  • 下載儀表站APP

  • Ybzhan手機版

  • Ybzhan公眾號

  • Ybzhan小程序

企業未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87759942