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SE系列電泳儀蛋白電泳成套試劑配制說(shuō)明

來(lái)源:河南科瑞科技有限公司-中國(guó)種子檢驗(yàn)儀器專家   2007年08月15日 10:13  
1.電極緩沖液的配制
      剪開(kāi)1號(hào)試劑袋,將試劑倒入2000ml燒杯中,用約50ml蒸餾水分?jǐn)?shù)次將試劑袋中殘留試劑洗入燒杯;敲開(kāi)2號(hào)針劑瓶,將試劑倒入同一燒杯中,用約50ml蒸餾水分三次以上將針劑瓶中殘留試劑洗入燒杯,加入約1600ml蒸餾水,攪拌至*溶解,用蒸餾水定容至2000ml混勻。
注:該配制量夠2個(gè)電泳槽使用有余,測(cè)純度時(shí)400粒樣品需同法配制2份該溶液,該溶液臨用前現(xiàn)配,可重復(fù)使用6次。

2.凝膠貯備液的配制:
      a. 貯備液A: 戴上乳膠手套,在臺(tái)式天平上稱取90克丙烯酰胺和3克N,N洹羌諄0罰谷?00ml燒杯中,加入350ml蒸餾水,攪拌至*溶解,約需0.5小時(shí),用蒸餾水準(zhǔn)確定容至500ml,過(guò)濾溶液于棕色瓶中,放冰箱內(nèi)保存。
注:該配制量夠測(cè)4個(gè)樣品純度使用,每個(gè)樣品400粒,以下同,保存期為1個(gè)月。
      b. 貯備液B:取出3號(hào)針劑瓶,用鑷子敲開(kāi),加入少量蒸餾水溶解,倒入150ml燒杯中,用約20ml蒸餾水分三次以上將針劑瓶中殘留試劑洗入燒杯,再加入50ml蒸餾水,攪拌混勻,用蒸餾水準(zhǔn)確定容至100ml,倒入棕色瓶中,放冰箱內(nèi)保存。
注:該配制量能夠測(cè)4個(gè)樣品,保存期一個(gè)月,保存中如出現(xiàn)混濁或沉淀,則需重新配制。
      c. 貯備液C:剪開(kāi)4號(hào)試劑袋,將試劑倒入250ml燒杯中,用約30ml蒸餾水分?jǐn)?shù)次將試劑袋中殘留試劑洗入燒杯中,再加入150ml蒸餾水,攪拌至*溶解,用蒸餾水準(zhǔn)確定容至200ml,倒入棕色瓶中,放冰箱內(nèi)保存。
注:該配制量夠測(cè)4個(gè)樣品純度,保存期一個(gè)月。
      d. 貯備液D:剪開(kāi)5號(hào)試劑袋,將試劑倒入100ml燒杯中,用約30ml蒸餾水分?jǐn)?shù)次將試劑袋中殘留試劑洗入燒杯,攪拌至*溶解,用蒸餾水準(zhǔn)確定容至50ml,倒入棕色瓶中,放冰箱內(nèi)保存。
注:該配制量夠測(cè)5個(gè)樣品純度,保存期一個(gè)月。
      e. 貯備液E: 取出6號(hào)針劑瓶,用鑷子敲開(kāi),加入少量蒸餾水溶解,倒入100ml燒杯中,用30ml蒸餾水分三次以上將針劑中殘留試劑洗入燒杯中,混合均勻,用蒸餾水準(zhǔn)確定容至50ml,倒入棕色瓶,放冰箱內(nèi)保存。
注:該配制量夠測(cè)5個(gè)樣品純度,其他事項(xiàng)同貯備液B注。
      f. 貯備液F:戴上乳膠手套,剪開(kāi)7號(hào)試劑袋,將試劑倒入150ml燒杯中,用約60~70ml蒸餾水分?jǐn)?shù)次將試劑袋中殘留試劑洗入燒杯,攪拌至*溶解,約需0.5小時(shí),用蒸餾水準(zhǔn)確定容至100ml,濾入棕色瓶中,放冰箱內(nèi)保存。
注:該配制量夠測(cè)5個(gè)樣品純度,保存期一個(gè)月。
      g. 貯備液G:將8號(hào)小塑料瓶剪開(kāi),將試劑擠入棕色小滴瓶,用移液管加9ml蒸餾水,放冰箱內(nèi)保存。
注:該配制量夠測(cè)10個(gè)樣品純度,保存期一個(gè)月。

3.樣品提取液的配制
      剪開(kāi)9號(hào)試劑袋,將試劑倒入1000ml燒杯中,用約100ml蒸餾水分?jǐn)?shù)次將殘留試劑洗入燒杯中,然后加入約700ml蒸餾水,攪拌至*溶解,放在電爐上加熱至沸,放冷,用新煮沸過(guò)的冷蒸餾水定容至1000ml,過(guò)濾提取液于試劑瓶中,放冰箱內(nèi)保存。
注:該配制量夠測(cè)定2~3個(gè)樣品純度,保存期為1個(gè)月以上,如保存過(guò)程中出現(xiàn)混濁,則需重新配制。

4.染色液配方:
      將考馬斯亮藍(lán)R-250配成2%W/V的乙醇溶液,用濾紙過(guò)濾,放入試瓶中備用。另用蒸餾水配制10%W/V的三氯乙酸溶液。使用時(shí),取10ml考馬斯亮藍(lán)R-250的乙醇溶液,加到200ml三氯乙酸溶液中,混勻。

 貯  備  液
   編   號(hào)
                   分   離   膠                   濃   縮   膠
   一塊板取膠量   五塊板取膠量   一塊板取膠量   五塊板取膠量
       A        12.5ml        62.5ml  
       B          2.5ml        12.5ml  
       C             5ml           25ml  
       D              1ml            5ml
       E              1ml            5ml
       F              2ml          10ml
       G            20μl          100μl           40μl         200μl

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