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　　賽默飛色譜柱的原理是根據(jù)進入色譜柱的化合物的極性，沸點等一系列的化學性質(zhì)，固定相對于它們有著不同的吸附和解吸附的能力，導致化合物在色譜柱上被分離。賽默飛色譜柱在使用前，進行柱的性能測試，并將結(jié)果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照賽默飛色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是*條件)，只有這樣，賽默飛色譜柱測得的結(jié)果才有可比性。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同。

　　賽默飛色譜柱實驗前樣品的前處理

　　1、使用流動相溶解樣品。

　　2、使用預處理柱除去樣品中的強極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。

　　3、使用0.45μm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì)。

　　流動相的配制

　　液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達到分離的目的，因此賽默飛色譜柱要求流動相具備以下的特點：

　　1、流動相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在賽默飛色譜柱中)。

　　2、流動相與樣品不產(chǎn)生化學反應(yīng)。

　　3、流動相的黏度要盡量小，以便得到好的分離效果；降低賽默飛色譜柱壓降，延長泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。

　　4、在流動相配制好后，一定要進行脫氣。賽默飛色譜柱除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止流動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。

　　5、流動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應(yīng)。如使用UV檢測器，使用對紫外吸收較低的溶劑配制。

　　6、流動相沸點不要太低，否則容易產(chǎn)生氣泡，導致賽默飛色譜柱實驗無法進行。