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　　高效液相色譜儀的實驗原理：

　　高效液相色譜分離是利用試樣中各組分在色譜柱中的淋洗液和固定相間的分配系數(shù)不.同，當試樣隨著流動相進入色譜柱中后，組分就在其中的兩相間進行反復(fù)多次的分配（吸附一脫附一放出）由于固定相對各種組分的吸附能力不同（即保存作用不同），因此各組份在色譜柱中的運行速度就不同，經(jīng)過一定的柱長后，便彼此分離，順序離開色譜柱進入檢測器，產(chǎn)生的離子流信號經(jīng)放大后，在記錄器上描繪出各組分的色譜峰。

　　結(jié)構(gòu)及功能：

　　1、數(shù)據(jù)處理和記錄系統(tǒng)：對色譜數(shù)據(jù)進行處理，并參與HPLC儀器的自動控制；

　　2、分離系統(tǒng)：色譜柱：對樣品進行分離，是整個色譜系統(tǒng)的心臟，它的質(zhì)量優(yōu)劣直接影響到分離的效果；

　　3、檢測系統(tǒng)：檢測器：將色譜柱連續(xù)流出的樣品組分轉(zhuǎn)變成易于測量的電信號，被數(shù)據(jù)系統(tǒng)接收，得到樣品分離的色譜圖；

　　4、進樣系統(tǒng)：進樣器：是將樣品送入色譜柱的裝置，進樣方式可以分為兩種：閥進樣或自動進樣。比較常用的是采用自動進樣器裝樣；

　　5、溶劑輸送系統(tǒng)：

　　a、儲液器：用來貯存數(shù)量足夠、符合要求的流動相。配有溶劑過濾器，以防止流動相中的顆粒進入泵內(nèi)；

　　b、脫氣器：脫氣的目的是為了防止流動相從色譜柱內(nèi)流出時釋放出氣泡進入檢測器，從而引起噪聲，不能正常檢測；

　　c、輸液泵：將儲液器中的流動相連續(xù)不斷地以高壓形式進入液路系統(tǒng)，使樣品在色譜柱中完成分離過程；

　　d、梯度洗脫裝置：是在分離過程中通過逐漸改變流動相的組成增加洗脫能力的一種裝置。

　　儀器操作：

　　1、開機，啟動裝置，進入Win2000；開啟LC，點擊Instrumentlonline圖標，進入儀器控制面板，設(shè)置所需各項參數(shù)。

　　2、設(shè)置分析用流動相清洗流路，等待色譜柱、系統(tǒng)的平衡，基線穩(wěn)定，開始進樣分析。

　　3、分析結(jié)束，數(shù)據(jù)處理，打印報告。

　　4、關(guān)閉柱溫箱和檢測器，沖洗色譜柱，關(guān)閉脫氣機、泵，關(guān)閉整個裝置。

　　5、關(guān)閉總電源。

　　6、在記錄本上記錄使用情況。