人腫瘤壞死因子α(TNFα)檢測試劑盒注意事項:
1.保存:試劑盒中各試劑請按說明書提示合理存放。在儲存及溫育過程中避免將試劑暴露在強 光中。所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發和微生物的污染,否則可能會出現錯誤的結果。
2.酶標板:剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質,此為正常現象,不會對實驗結果造成 任何影響。暫時不用的板條應拆卸后放入備用鋁箔袋,按推薦溫度存放!
3.加樣:加樣或加試劑時,個孔與后一個孔的加樣時間間隔如果太大,將會導致不同的 “預溫育”時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。每次的加樣時間hao控制在 10分鐘內。推薦設置復孔。
4.溫育:為防止樣品蒸發,實驗時必須給酶標板覆膜;洗板后應盡快進行下步操作,避免酶標 板處于干燥狀態;嚴格遵守給定的溫育時間和溫度。
5.洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在吸水紙上拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸 水。在讀數前要注意清除底部殘留的液體和手指印,以免影響酶標儀讀數。
6.試劑配制:Concentrated Biotinylated Detection Ab及Concentrated HRP Conjugate體積較 小,運輸過程會使液體沾到管壁或瓶蓋,因此使用*0轉/分離心1min,以使附著管壁或瓶 蓋的液體沉積到管底。取用前,請用移液器小心吹打4-5次使溶液混勻。標準品、生物素化抗 體工作液、酶結合物工作液請根據所需用量配制,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請 精確配制標準品及工作液,盡量不要微量配制(如吸取Concentrated Biotinylated Detection Ab時,一次不要小于10μL),以避免由于不準確稀釋而造成濃度誤差;請勿重復使用已稀釋 過的標準品、生物素化抗體工作液、酶結合物工作液。若需要分次使用標準品應按照每一次 用量分裝,將其放在-20~-80℃貯存。避免反復凍融。
7.顯色時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如每隔5分鐘),如梯度已很 明顯,請提前加入終止液終止反應,避免顏色過深影響酶標儀讀數。
8.底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
9.混勻:充分輕微混勻對反應結果尤為重要,hao使用微量振蕩器(使用低頻率),如無微量 振蕩器,可在反應前手工輕輕敲擊酶標板框混勻。
10.安全:試驗中請穿著實驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液樣品 時,請按國家生物試驗室安全防護條例執行。
11.人腫瘤壞死因子α(TNFα)檢測試劑盒不同批號的試劑盒組份不能混用(洗滌液和反應終止液除外)
12.試驗中所用的EP管和吸頭均為一次性使用,嚴禁混用,否則將影響試驗結果!
結果判斷:
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