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ELISA試劑盒供應(yīng)商研究真核基因的基礎(chǔ)的工作之一就是確定其轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn),目前通用的方法是5′-RACE法,RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)是Frohman發(fā)明的、通過(guò)PCR快速克隆cDNA末端的技術(shù),它在不建立cDNA文庫(kù)的前提下,利用已知cDNA序列設(shè)計(jì)引物,通過(guò)往兩端延伸和擴(kuò)增獲得其5′-端序列。本試劑盒就是根據(jù)5′-RACE原理而開(kāi)發(fā),它具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,客戶不需要單獨(dú)準(zhǔn)備各種材料。
2. 反應(yīng)條件經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,包括使用無(wú)RNase H活性的MMLV和優(yōu)化的引物。
樣本正常的參考范圍,由于各個(gè)廠家的試劑及各個(gè)實(shí)驗(yàn)室的做的結(jié)果都會(huì)有差異的,建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室建立自己的參考范圍,正常標(biāo)本要經(jīng)過(guò)多個(gè)項(xiàng)目的驗(yàn)證保證樣本是正常的,一般情況有2種方法來(lái)確定正常的參考范圍,一種是用95%的可信區(qū)間來(lái)確定,即:正常樣本的平均值±1.96SD(標(biāo)準(zhǔn)差),一種是99%可信區(qū)間來(lái)確定即:正常樣本的平均值±2.576SD(標(biāo)準(zhǔn)差).任何參考范圍都不是的,有部分個(gè)體的值高一點(diǎn)或者低一點(diǎn)都是有可能的,所以根據(jù)各自的需求,去建立各自的可信區(qū)間參考范圍。
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