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PCR相關(guān)試劑
微生物菌種矮棒曲霉保藏方法2024/2/26
保藏菌種方法大致可分為六種:1.傳代培養(yǎng)保藏法又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧細菌用),培養(yǎng)后于4—6℃冰箱內(nèi)保存。2.液體石蠟覆蓋保藏法是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長保藏...
培養(yǎng)基的制備過程2024/2/18
培養(yǎng)基的制備過程:1.培養(yǎng)基用水培養(yǎng)基制備用水應(yīng)使用電阻率不小于30萬Ωcm的蒸餾水或與其同質(zhì)的水,最好不使用離子交換器生產(chǎn)的去離子水。2.稱量稱量時要用專用的角匙,避免交叉污染而影響檢驗結(jié)果;干粉培...
小鼠ELISA檢測試劑盒實驗結(jié)果判斷及注意事項2024/2/5
實驗結(jié)果判斷:1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為...
原代細胞與細胞系是什么2024/1/29
原代細胞(primarycell)是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養(yǎng)的細胞,稱為原代細胞。細胞系(cellline)是原...
影響PCR熱循環(huán)的變性退火溫度2024/1/22
在PCR自動熱循環(huán)中,最關(guān)鍵的因素是變性與退火的溫度。如操作范例所示,其變性、退火、延伸的條件是:94℃60s,37℃60s,72℃120s,共25~30個循環(huán),擴增片段500bp。在這里,每一步的時...
PCR反應(yīng)中的主要成份引物遵循原則2024/1/15
PCR反應(yīng)產(chǎn)物的特異性由一對上下游引物所決定。引物的好壞往往是PCR成敗的關(guān)鍵。引物設(shè)計和選擇目的DNA序列區(qū)域時可遵循下列原則:(1)引物長度約為16-30bp,太短會降低退火溫度影響引物與模板配對...
影響ELISA試劑盒質(zhì)量因素詳細分析2024/1/8
ELISA試劑盒變質(zhì)是ELISA實驗中比較常見的問題,ELISA試劑盒變質(zhì)詳細分析如下:1、試劑因素不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量全一致,即使是通過批批檢的項目其檢測結(jié)果也存在差異,...
凍存細胞收到后處理2024/1/2
凍存細胞收到后處理:1、收到快遞后,若發(fā)現(xiàn)凍存管破損、箱內(nèi)已無干冰,請拍照后及時聯(lián)系供貨商。2、收到細胞后請盡快復(fù)蘇,給凍存管(外觀×1張)拍照留存,隔天在倒置顯微鏡下確認細胞狀態(tài),給細胞(100倍×...
ELISA 實驗中各類組織勻漿收集過程2023/12/25
ELISA實驗中各類組織勻漿(容易勻漿的組織)的采集、處理和保存;(需要測蛋白濃度)1、采集組織,在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,稱重,剔除附屬的結(jié)締組織,稱取組織塊。2、用移液管量取0....
質(zhì)粒抽提提取方法2023/12/18
質(zhì)粒抽提(PlasmidExtraction)方法即去除RNA,將質(zhì)粒與細菌基因組DNA分開,去除蛋白質(zhì)及其它雜質(zhì),以得到相對純凈的質(zhì)粒。提取質(zhì)粒DNA的方法有很多種,從提取產(chǎn)量上分可分為微量提取、中...
高效液相色譜儀(HPLC)應(yīng)用技巧匯總2023/12/11
高效液相色譜儀(HPLC)也叫高壓液相色譜、高速液相色譜、高分離度液相色譜等,它是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻...
豬細小病毒PCR試劑盒試驗操作流程2023/12/4
豬細小病毒PCR試劑盒試驗操作流程:1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;3.樣本孔中加入待測...
緩沖液的PH要大于包被蛋白的PI原因2023/11/28
為什么緩沖液的PH大于蛋白的PI包被效果好呢,跟蛋白的帶電荷情況有沒有關(guān)系,蛋白和聚苯乙烯板子結(jié)合的詳細過程目前上不是很明了,目前認為是通過靜電吸附在板子上的,而聚苯乙烯板子一般在出廠前也要經(jīng)過強電廠...
矮棒曲霉低溫存法與保藏方法2023/11/20
低溫存法:①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕...
免疫共沉淀(Co-IP)優(yōu)缺點詳述2023/11/13
以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法,是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。其原理是:當(dāng)細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間...

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