傳統的微小核糖核酸(miRNA)檢測技術主要包括Northern印跡法、實時定量反轉錄PCR、微陣列芯片法、測序等,然而均存在一些固有的缺點或不足。紙張作為用途廣泛的天然高分子材料,具有成本低、柔韌性高、便攜性好、可生物降解等諸多特點。紙基比距傳感器作為一類新興的即時檢測(POCT)裝置,是圍繞紙基材料的功能化設計的,根據待測目標觸發反應產生的可觀測距離信號進行定性或定量分析,具有讀數直觀且操作簡便等優點。
近期,蘇州醫工所繆鵬課題組結合鏈置換策略開發了一種基于可編程DNA水凝膠的紙基比距傳感器。如圖1所示,目標miRNA引發的鏈置換聚合反應能夠生成大量的單鏈DNA,用于與另一條序列雜交并協助DNA水凝膠的組裝。該體系在紙基條帶上的浸潤距離可用于反映目標miRNA的濃度。實驗采用蘇州醫工所自主研發的驗證并優化了DNA水凝膠的形成及反應參數。紙基傳感器通道上流動距離的變化與DNA水凝膠的粘度(組裝程度)密切相關,根據反應溶液沿條帶流動的數學模型,對紙基傳感器的通道寬度、樣品量、反應時間以及DNA水凝膠的制備條件進行了全面的優化。在相應的實驗參數下,進行了miRNA定量、選擇性檢驗及臨床樣品測試,相應結果與實時定量反轉錄PCR得出的結果高度一致。
該方法不僅靈敏度高,而且具有操作方便、成本低等優點,能夠滿足即時檢測的要求,在生物學研究和臨床疾病診斷方面顯示出巨大的應用潛力。
來源:傳感器專家網
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