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利用SC-ICP-MS 法測定單個細菌細胞中的鐵含量

優勢：

ICP-MS 法可以分析成批培養的細菌細胞中的總金屬含量，然后根據測得的細胞總數平均算出單個細菌細胞的鐵含量。由于平板計數法無法計算死亡細胞或未被培養的完整細胞，導致計數出現誤差。然而，由于儀器的限制，目前還未見有方法可直接分析單個細菌細胞中的鐵含量。基于單細胞ICP-MS (SC-ICP-MS) 分析技術取得的重大進展，使得直接測定單個細胞內金屬含量成為現實。PerkinElmer 公司的Asperon™單細胞霧室將單個完整細胞引入ICP-MS的等離子體中，結合NexION® 系列ICP-MS 質譜儀瞬時采集速度快的優勢，可確定單個細菌細胞內的鐵含量。在本次實驗中，我們利用SC-ICP-MS 法分別測定了三種菌株的單個細胞的鐵含量。這三個菌株分別是大腸桿菌B 株(Eco)、枯草芽孢桿菌168 株(BAC) 和紅球菌RHA1 株(RHA)。SC-ICP-MS 技術可直接測定單個細胞的鐵含量，并確定每種菌株的鐵含量分布情況。鐵含量與細菌的細胞大小相關，即大菌株(RHA)單個細胞的平均鐵含量高，而小菌株(Eco) 單個細胞的平均鐵含量低。

內容簡介：

對于SC-ICP-MS 分析，大腸桿菌B 株、枯草芽孢桿菌168 株和紅球菌RHA1 株均生長至具有相同的光密度，并離心至一個細菌細胞聚合體上。然后，立即將樣品冷凍、冷凍干燥并混勻。稱取制備好的樣品(10 - 30 mg) 放入Savillex® PFA 中。加入Optima® 級濃硝酸在電熱板上進行密閉消解。消解后將樣品加熱至近干，復溶于5 mL 的0.05 M HNO3 中。加拿大國家研究院的NRCC 龍蝦肝胰臟(TORT-1) 作為標準參考物質。使用純氨氣的反應模式分析56Fe。

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